建立产生gfp报道基因重组EB病毒细胞株

• 作者: John R.Arrand 陈小毅
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 爱泼斯坦-巴尔病毒 重组病毒 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 87-90
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 字数: 2999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2003.02.002

摘要

目的建立产生带有gfp报道基因的重组EB病毒株. 方法构建一个有EBV DNA BamHⅠ的C和H片段、gfp报道基因和puromycin选择基因的真核细胞穿梭质粒(pGFPUROEB);采用电穿孔法将其转染于B95-8细胞中,并用荧光显微镜和流式细胞仪检测gfp的表达,PCR及Southern blot检测重组gfp EB病毒基因. 结果经puromycin的长期筛选,建立80%以上表达gfp的B95-8细胞株(称gfpB95-8),PCR检测有gfp基因;经Southern blot检测证实gfpB95-8可产生重组gfp的EB病毒. 结论构建了gfp报道基因和puromycin选择基因的真核细胞穿梭质粒;并成功建立产生带有gfp报道基因的重组EB病毒株.