重组体pcDNA3.1(+)-tyr的构建及在小鼠NIH3T3细胞中的表达

• 作者: 吉琼梅 岳滔 张海涛 朱振宇 李秀英 李茜 马涧泉
• 来源期刊: 中山大学学报(医学科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 黑色素瘤细胞 一元酚单氧酶/遗传学 质粒,pcDNA3.1(+) 基因表达
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 358-362
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 字数: 3969字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2003.04.015

摘要

[目的]克隆酪氨酸酶基因(tyr),构建pcDNA3.1(+)-tyr真核表达重组体,并导入NIH3T3细胞表达.[方法]用RTPCR法从小鼠B16黑色素瘤细胞中克隆tyr全长cDNA片段,利用DNA重组技术将其定向插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)的T7启动子下游,并用脂质体法导入NIH3T3细胞,RT-PCR,酪氨酸酶活性测定及多巴染色法检测tyr的表达.[结果]成功克隆1.74kb的全长tyrcDNA片段,经测序证实与GenBank所报道的序列完全一致,tyr准确克隆入pcDNA3.1(+)的多克隆位点,RT-PCR及酪氨酸酶活性测定等方法检测到转染了重组体的NIH3T3细胞中有tyr的表达.[结论]本实验成功构建了pcDNA3.1(+)-tyr真核表达重组体,并成功导入NIH3T3细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李秀英	中山大学中山医学院生物化学教研室	15	75	5.0	8.0
2	朱振宇	中山大学中山医学院生物化学教研室	51	397	8.0	18.0
3	李茜	中山大学中山医学院生物化学教研室	7	13	2.0	3.0
4	岳滔	中山大学中山医学院生物化学教研室	4	11	2.0	3.0
5	张海涛	中山大学中山医学院生物化学教研室	8	36	3.0	6.0
6	吉琼梅	中山大学中山医学院生物化学教研室	5	25	2.0	5.0