Acrp30基因的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 彭剑淳 王会中 王全立 詹林盛
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: Acrp30 碱基序列 印迹法,蛋白质 大肠杆菌 基因表达
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-15,18
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3031字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2003.01.004

摘要

目的:克隆人Acrp30基因,并在大肠杆菌中表达.方法:提取人脂肪组织总RNA,经RT-PCR扩增目的cDNA片段,进行核苷酸序列分析;将该基因克隆入原核表达载体pQE-30,在大肠杆菌M15中表达,用Ni2+固相化的螯合Sepharose Fast Flow亲和层析纯化重组蛋白;并用Western印迹检测所制备多克隆抗体的特异性.结果:从人脂肪组织总RNA中扩增得到736 bp的目的cDNA,其序列与已报道的序列完全一致,并在大肠杆菌中成功获得高水平表达,蛋白相对分子质量大约为30×103,其表达量占菌体总蛋白的15%左右.重组蛋白经Ni2+固相化的螯合Sepharose Fast Flow亲和层析纯化,纯度>90%.Western印迹试验证实所制备多克隆抗体具有较高特异性.结论:本研究为进一步探讨Acrp30在肥胖症和糖尿病患者中的表达情况以及Acrp30的作用机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王全立	军事医学科学院输血医学研究所	126	899	16.0	25.0
2	詹林盛	军事医学科学院输血医学研究所	64	450	11.0	19.0
3	王会中	军事医学科学院输血医学研究所	8	42	4.0	6.0
4	彭剑淳	军事医学科学院输血医学研究所	23	345	8.0	18.0