赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达

• 作者: 周晓黎 徐自忠 杨云庆 杨晶焰 花群义 董俊 贾建军
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 赤羽病病毒 核蛋白基因 表达 ELISA
• 年，卷（期）: 2003,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-14
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 7296字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2003.10.002

摘要

为获得赤羽病病毒(Akabane virus, AKAV)的核蛋白重组抗原,根据其基因序列(S mRNA)设计合成了1对特异性引物,对AKAV N基因进行RT-PCR扩增,产物大小约为696 bp,回收纯化后,将其克隆至pMD18-T质粒载体中,经核苷酸序列分析,与已报道的多株AKAV编码核衣壳蛋白N的S mRNA基因比较后发现,所测定毒株的核苷酸序列与TIN毒株的同源性高达98.3%,推测的氨基酸同源性为97.6%,证实为AKAV的N基因.将该基因片段亚克隆插入pBAD/Thio TOPO表达载体,转化TOP10细胞,成功地构建了AKAV N基因重组表达载体.经L-araboinose诱导表达,可稳定、高效地表达AKAV核蛋白抗原.表达蛋白为融合蛋白,分子质量约42.5 ku,其表达产量约占菌体总蛋白的28%,融合蛋白中含有AKAV特异性核蛋白抗原,可作为ELISA包被抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	花群义	云南出入境检验检疫局技术中心	24	371	13.0	18.0
2	杨云庆	云南出入境检验检疫局技术中心	19	263	10.0	16.0
3	周晓黎	云南出入境检验检疫局技术中心	33	443	13.0	19.0
4	董俊	云南出入境检验检疫局技术中心	26	405	12.0	19.0
5	徐自忠	云南出入境检验检疫局技术中心	25	382	13.0	18.0
6	杨晶焰	云南出入境检验检疫局技术中心	8	120	6.0	8.0
7	贾建军	云南出入境检验检疫局技术中心	7	97	5.0	7.0