肌损伤基因治疗中的质粒载体pIRES2-EGFP-MyoD的构建及其在MSCs中的表达

• 作者: 张勇 王劲 程天民 罗成基 范文辉 邹仲敏 郭朝华
• 来源期刊: 西南国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 生肌调节因子 MyoD 质粒 转染
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 265-268
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 2691字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0188.2003.03.015

摘要

目的:构建鼠真核表达的双顺反子质粒载体pIRES2-EGFP-MyoD,为研究MyoD对肌损伤的修复作用提供物质基础.方法:从质粒EMSV上用EcoRI酶切下MyoD cDNA片段,进行琼脂凝胶电泳,切胶回收纯化;EcoRI酶切pIRES2-EGFP,将线性化的载体与回收MyoD cDNA片段用T4DNA连接酶连接,克隆出双顺反子质粒载体pIRES2-EGFP-MyoD,用HindⅢ酶切对重组质粒进行鉴定:用脂质体转染的方法将重组质粒转入间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)中，G418筛选，在荧光显微镜下观察其表达。结果：凝胶电泳证明将MyoD cDNA亚克隆入pIRES2-EGFP内，荧光显微镜下可MSCs胞体发出绿色荧光。结论：成功地构建了鼠真核表达的双顺反子质粒载体pIRES2-EGFP-MyoD。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张勇	第三军医大学西南医院血液科	97	606	14.0	19.0
2	程天民	第三军医大学西南医院血液科	107	1043	17.0	28.0
3	罗成基	第三军医大学西南医院血液科	75	563	11.0	20.0
4	王劲	第三军医大学西南医院血液科	48	212	7.0	11.0
5	郭朝华	第三军医大学西南医院血液科	32	158	6.0	11.0
6	范文辉	第三军医大学西南医院神经内科	50	297	11.0	14.0
7	邹仲敏	第三军医大学西南医院血液科	57	215	7.0	11.0