幽门螺杆菌临床菌株尿素酶B亚单位原核表达系统的构建及其重组蛋白免疫性的鉴定

• 作者: 严杰 毛亚飞 钊守凤 陈喆
• 来源期刊: 浙江大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门,螺杆菌 ureB基因 碱基序列 克隆,分子 UreB融合蛋白/免疫性
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 4-8
• 页数: 5页
• 分类号: R377|R392.2
• 字数: 2184字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2003.01.002

摘要

目的:克隆幽门螺杆菌(Hp)ureB基因并构建其原核表达系统.方法:采用高保真PCR从幽门螺杆菌临床分离菌株Y06中扩增ureB基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET32a的ureB表达载体,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导表达,采用Hp全菌抗体的Western blot和兔抗融合蛋白血清的免疫扩散试验鉴定其免疫性.结果:所克隆的ureB基因与报道的相应核苷酸序列同源性为96.88%～97.82%,氨基酸序列同源性高达99.65%～99.82%.pET32a-ureB-BL21DE3系统的UreB融合蛋白表达量高达细菌总蛋白的40%左右.UreB融合蛋白能与Hp全菌抗体发生结合反应,免疫家兔能获得高效价抗体.结论:本研究成功地构建了Hp ureB高效表达系统,所表达的UreB融合蛋白有良好的免疫原性和免疫反应性,可作为Hp疫苗的抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严杰	浙江大学医学院病原生物学教研室	265	1149	14.0	20.0
2	毛亚飞	浙江大学医学院病原生物学教研室	41	232	9.0	12.0
3	陈喆	浙江大学医学院病原生物学教研室	8	65	4.0	8.0
4	钊守凤	浙江大学医学院病原生物学教研室	7	42	3.0	6.0