桥粒芯胶蛋白3前导肽基因的克隆和原核表达

• 作者: David R.Garrod 李光富 潘永正 王飞
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 桥粒 桥粒芯胶蛋白3 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 287-290
• 页数: 4页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 3106字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2004.05.001

摘要

目的:克隆人桥粒芯胶蛋白3前导肽(Dc3p)基因,并进行表达、纯化和鉴定.方法:用PCR法从桥粒芯胶蛋白(Dc)cDNA文库中扩增出Dc3p基因,与pGEX-4T-2载体连接成重组表达质粒pGEX-4T-2/Dc3p;重组质粒转入BL21大肠杆菌,经诱导表达谷胱甘肽S-转移酶-Dc3p(GST-Dc3p)融合蛋白,该蛋白经Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化,SDS-PAGE和免疫印迹法检测鉴定.结果:经酶切及序列分析鉴定,重组质粒pGEX-4T-2/Dc3p成功构建,诱导后高表达GST-Dc3p融合蛋白并得到纯化,免疫印迹法证实表达蛋白为GST-Dc3p.结论:获得高表达、高纯度的GST-Dc3p融合蛋白,为Dc3p的功能及免疫学分析打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王飞	东南大学附属中大医院皮肤科	143	295	9.0	12.0
2	李光富	南京医科大学病原生物学系	20	120	8.0	10.0
3	潘永正	东南大学附属中大医院皮肤科	27	116	7.0	9.0