人氨肽酶N基因克隆和原核表达

• 作者: 兰风华 吴玉水 朱忠勇 涂向东 谢飞
• 来源期刊: 医学研究生学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 氨肽酶N 基因克隆 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2004,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 691-693
• 页数: 3页
• 分类号: Q785
• 字数: 2013字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-8199.2004.08.006

摘要

目的:构建人氨肽酶N(APN)-谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白(APN-GST),并进行原核表达. 方法:根据人APN mRNA序列设计合成特异性引物,从人肝组织中提取总RNA并反转录成cDNA第一链,RT-PCR扩增人APN基因,并插入融合蛋白原核表达载体pGEX-4T,转化宿主菌BL21(DE3)细胞,异丙基锍基半乳糖(IPTG)诱导表达APN蛋白.包涵体经尿素变性、重折叠和亲和层析纯化. 结果:重组质粒测序和酶切结果显示:APN基因已正确插入pGEX-4T,重组蛋白及纯化产物SDS-PAGE在135000处有一条明显的蛋白表达条带. 结论:人APN基因已被成功地克隆、表达和纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	涂向东	南京军区福州总医院解放军医学检验中心实验科	46	140	6.0	10.0
2	朱忠勇	南京军区福州总医院解放军医学检验中心实验科	98	953	11.0	29.0
3	兰风华	南京军区福州总医院解放军医学检验中心实验科	88	314	9.0	12.0
4	吴玉水	南京军区福州总医院解放军医学检验中心实验科	19	111	5.0	10.0
5	谢飞	南京军区福州总医院解放军医学检验中心实验科	25	134	8.0	11.0