人Bcl-w基因的克隆和原核表达

• 作者: 戴晓莉 杜鸿 王敏
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: Bcl-w基因 基因克隆 RT-PCR 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 经验技术交流
• 页码范围: 176-178
• 分类号: R393
• 字数: 2486字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2012.02.023

摘要

目的:克隆人Bcl-w基因并原核表达Bcl-w融合蛋白.方法:提取人胃癌组织总RNA;采用RT-PCR方法扩增Bcl-w基因编码区,构建重组质粒pet28a/Bcl-w,转化大肠埃希菌ROS,测序鉴定后经增菌培养,30 ℃诱导6 h表达Bcl-w蛋白,免疫印迹法鉴定主要以包涵体形式存在的带有His标签的融合蛋白.结果:从人胃癌组织中扩增得到Bcl-w基因,其编码区长582 bp,编码193个氨基酸,与基因库中发表的序列同源性100%;成功构建了原核表达载体pet28a/Bcl-w,并在工程菌ROS中获得大量表达.结论:获得了人Bcl-w基因,成功制备出人Bcl-w融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜鸿	苏州大学附属第二医院检验科	51	186	8.0	11.0
2	王敏	苏州大学附属第二医院检验科	58	145	6.0	9.0
3	戴晓莉	苏州大学附属第二医院检验科	7	9	1.0	2.0