pcDNA3.1-UDPGT1A9表达质粒的构建及其转基因细胞系的建立

• 作者: 曾苏 李新 李旭梅 陈枢青
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 葡糖醛酸基转移酶 转染,细胞系 色谱法,高压液相 山萘酚
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 115-120
• 页数: 6页
• 分类号: R966
• 字数: 3804字
• 语种: 英文

摘要

目的为建立能稳定表达人葡糖醛酸转移酶UDPGT1A9蛋白的CHL-UDPGT1A9转基因细胞系,并鉴定其对药物的葡糖醛酸缀合活性.方法利用基因亚克隆技术,将UDPGT1A9 cDNA从pREP9-UDPGT1A9构建到哺乳动物表达载体pcDNA3.1中,形成真核细胞表达重组子pcDNA3.1-UDPGT1A9,再转染于中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)中,通过G418筛选阳性克隆,建立稳定表达UDPGT1A9的CHL-UDPGT1A9转基因细胞系,并以山萘酚为底物,采用HPLC方法对其代谢活性进行鉴定.结果建立了CHL-UDPGT1A9转基因细胞系,通过HPLC分析其对山萘酚代谢活性为(1.02±0.11)μmol·min-1·g-1蛋白,而对照CHL细胞对底物无明显代谢.结论构建完成的转基因细胞系能稳定表达人体葡萄糖醛酸转移酶UDPGT1A9,并具有对山萘酚的代谢活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾苏	浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室	162	1373	22.0	31.0
2	李新	浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室	20	90	5.0	8.0
3	陈枢青	浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室	80	249	8.0	11.0
4	李旭梅	浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室	2	3	1.0	1.0