瘦素与绿色荧光蛋白融合基因的合成及其高效表达

• 作者: 于平野 吴晓萍 庞实锋 曲红艳 李校堃 王艳萍 郑青
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 瘦素 绿色荧光蛋白(GFP) 融合基因 高效表达
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 276-279
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2927字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2004.03.021

摘要

目的: 为了便于追踪瘦素(Leptin)在体内的去向,对其进行体内定位,设计合成Leptin荧光分子蛋白探针.方法:用PCR技术将Leptin cDNA与绿色荧光蛋白cDNA构建成融合基因LG,然后将其克隆进原核表达载体pET3c中,构建成原核表达工程菌BL21(DE3)/pET3c-LG.用Western-blot杂交检测重组蛋白的免疫原性,用荧光显微镜观察融合蛋白及其诱导菌休的发光活性.结果:DNA测序结果证实设计合成的融合基因与预期一致;构建的工程菌BL21(DE3)/pET3c-LG获得了表达,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的40%以上;Western-blot杂交检测表明重组蛋白具有Leptin的免疫原性;经IPTG诱导后的菌体及蛋白粗提液在荧光显微镜下可观察到其能发射出强烈的绿色荧光.结论:融合基因在大肠杆菌中实现了高效表达,表达的融合蛋白具Leptin的免疫原性和GFP的发光特性.为利用绿色荧光蛋白标记Leptin在动物体内的药物治疗的研究提供了一种新的途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑青	暨南大学药学院生物制药教研室	67	505	12.0	19.0
2	吴晓萍	暨南大学药学院生物制药教研室	48	316	9.0	15.0
3	李校堃	暨南大学药学院生物制药教研室	76	722	14.0	21.0
15	庞实锋	暨南大学药学院生物制药教研室	3	13	2.0	3.0
20	于平野		1	2	1.0	1.0
21	曲红艳		1	2	1.0	1.0
22	王艳萍		1	2	1.0	1.0