hCuZn-SOD基因的克隆、表达及其产物的初步纯化和表征

• 作者: 刘树滔 卢菀华 陈春 陈躬瑞 饶平凡
• 来源期刊: 福州大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 人铜/锌超氧化物歧化酶 克隆 RT-PCR 表达 融合蛋白 亲和层析
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 页码范围: 763-768
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2243.2004.06.024

摘要

为获得hCuZn-SOD基因,根据GenBank中人铜锌超氧化物歧化酶(hCuZn-SOD)基因碱基序列,设计扩增引物,用RT-PCR方法从人的肝细胞中克隆出hCuZn-SOD cDNA序列,并将它插入pUCm-T载体中,经过DNA序列测定证实,该片段序列的一个碱基发生突变(与报道基因相比),引起其编码第116个氨基酸由G变为D.采用定向克隆的方法将h Cu/Zn-SOD的cDNA片段克隆到表达载体pGEX-2T上,构建表达质粒pGEX-SOD,并转化大肠杆菌BL21(DE3).SDS-PAGE分析证实,经IPTG诱导,融合蛋白GST-SOD获得高效表达.破碎菌体、上清经谷胱甘肽亲和层析初步纯化后,得到纯度达90%的目的蛋白.活性实验表明,GST-SOD具有生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	饶平凡	福州大学生物工程研究所	181	1617	19.0	28.0
2	刘树滔	福州大学生物工程研究所	86	519	12.0	18.0
3	卢菀华	福州大学生物工程研究所	7	166	6.0	7.0
4	陈躬瑞	福州大学生物工程研究所	19	203	9.0	14.0
5	陈春	福州大学生物工程研究所	3	22	2.0	3.0