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摘要:
目的克隆人LIGHT分子的全长cDNA,构建重组真核表达质粒pCI-neo-LIGHT并在293T细胞上获得稳定表达.方法从人T细胞cDNA文库中用PCR技术克隆人LIGHT全长cDNA,装入T-Easy载体,测序证实后,将LIGHT cDNA装入质粒pCl-neo中构建真核表达载体.用电穿孔法转染293T细胞,经G418筛选后,用流式细胞仪检测LIGHT分子的表达.结果测序证实克隆的LIGHT全长cDNA阅读框正确完整,酶切证实LIGHT-pCI-neo中LIGHT插入方向正确.转染的293T细胞经G418筛选3个月后,流式细胞仪检测有78.69%的细胞表达人LIGHT分子.结论成功克隆LIGHT基因并获得稳定表达膜型LIGHT分子的293T细胞系.
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文献信息
篇名 人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达
来源期刊 第三军医大学学报 学科 医学
关键词 LIGHT 293T细胞 基因克隆 真核表达
年,卷(期) 2004,(8) 所属期刊栏目 基础医学
研究方向 页码范围 667-669
页数 3页 分类号 R394.2|R392.12
字数 3028字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-5404.2004.08.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 姜曼 第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所 48 115 6.0 8.0
2 黎万玲 第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所 35 92 6.0 7.0
3 白云 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室 99 429 11.0 15.0
4 黄钢 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室 20 95 5.0 9.0
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研究主题发展历程
节点文献
LIGHT
293T细胞
基因克隆
真核表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
第三军医大学学报
半月刊
1000-5404
50-1126/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩30号
78-91
1979
chi
出版文献量(篇)
15739
总下载数(次)
28
总被引数(次)
97850
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