pEGFP-PDX-1真核表达载体的构建

• 作者: 卫勃 孙晓艳 安靓
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: PDX-1 基因表达 绿色荧光蛋白 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 421-423
• 页数: 3页
• 分类号: R321.5
• 字数: 2219字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2005.06.008

摘要

目的:构建真核表达载体pEGFP-PDX-1,为基因水平研究PDX-1在肝干细胞定向分化中的调控机制提供理论参考.方法:参考分子克隆技术,采用PCR的方法从SK900/BLSCRIPT质粒中扩增PDX-1,同时将一个单个限制性酶切位点连接反应转变为以HindⅢ和BamHⅠ为末端的双限制性内切酶位点连接反应,将PDX-1 cDNA定向插入pEGFP-C1的多克隆位点中,构建重组表达质粒pEGFP-C1-PDX-1,并对重组子进行SmaⅠ单个限制性内切酶酶切鉴定.结果:构建了含有PDX-1 cDNA的真核表达载体pEGFP-PDX-1.结论:将PDX-1插入pEGFP-C1的C-末端,提高PDX-1在真核细胞中的表达,而且不影响其目的蛋白的结构和功能,对研究PDX-1调控肝干细胞的定向分化机制具有重要的意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙晓艳	解放军总医院基础医学研究所	22	112	5.0	10.0
2	安靓	南方医科大学组织学与胚胎学教研室	35	130	6.0	9.0
3	卫勃	解放军总医院普外科	76	545	13.0	19.0