水疱性口炎病毒糖蛋白基因主要抗原表位区在大肠埃希氏菌中的高效表达及纯化

• 作者: 刘俊辉 李葳 杨增岐 潘康锁 王若聪 祁会彩 蒋正军 郑增忍 龚振华
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 水疱性口炎病毒 糖蛋白 抗原表位 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 757-760
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.5|Q786
• 字数: 2922字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2005.10.001

摘要

利用PCR技术扩增编码水疱性口炎病毒印第安纳型(VSV-Ind)糖蛋白基因的主要抗原表位区,通过引入其两端的EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点,定向插入到pET30c质粒T7启动子下游的多克隆区,构建重组质粒pET30c-vsvG,并转化至宿主菌BL21(DE3)株中.用1 mmol/L IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳表明,重组蛋白在大肠埃希氏菌中得到了高效表达,经过4 h表达即可达到高峰;融合蛋白的相对分子质量为57 ku.重组蛋白含有六聚组氨酸尾,主要以包涵体形式存在,Ni柱纯化后的蛋白经Western-blotting鉴定,具有良好的抗原性和特异性.