狂犬病病毒糖蛋白膜外区基因在大肠埃希氏菌中的高效表达

• 作者: 叶菊秀 周继勇 李玲燕 蔡月琴
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 狂犬病病毒 糖蛋白膜外区 高效表达
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 449-453
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5|Q786
• 字数: 5613字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2006.06.005

摘要

为获得狂犬病病毒(RV)糖蛋白抗原,采用RT-PCR方法从狂犬病病毒ERA株中扩增了编码RV糖蛋白的全长基因,将其克隆于pMD18-T载体,再经PCR扩增出糖蛋白全长基因和膜外区基因,将其分别亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)、pET-32a(+)和pGEX-4T-1中,经PCR和双酶切鉴定以及序列分析,表明已成功构建了重组质粒.将重组质粒转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中进行表达,结果显示,克隆到pET-32a(+)的糖蛋白膜外区基因表达量最高,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的45.4%.经Western-blotting检测,不同载体表达的糖蛋白膜外区产物均可与兔抗RV多抗发生特异性反应,表明,重组蛋白具有良好的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周继勇	浙江大学动物预防医学研究所	86	753	16.0	23.0
2	叶菊秀	浙江大学动物预防医学研究所	8	120	5.0	8.0
3	李玲燕	浙江大学动物预防医学研究所	3	19	2.0	3.0
4	蔡月琴	浙江大学动物预防医学研究所	3	33	2.0	3.0