大鼠β细胞素蛋白的表达、纯化及生物学活性鉴定

• 作者: 安家泽 宋振顺 李开宗 窦科峰 韩骅
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: β细胞素 基因克隆 表达 蛋白质纯化
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 284-286
• 页数: 3页
• 分类号: R512.6
• 字数: 2971字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2005.03.006

摘要

目的:获得大量重组大鼠β细胞素并检测其活性.方法:用PCR法从大鼠肾组织中扩增534bp的β细胞素基因片段,并按读框克隆到原核表达载体pET28a(+)中.以构建的重组质粒pET28a-rBTC转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,在IPTG诱导下表达β细胞素蛋白,表达产物用SDS-PAGE和Western blot检测.采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白.结果:经IPTG诱导后,在大肠杆菌中可表达相对分子质量Mr为20000的目的蛋白.目的蛋白主要以包涵体的形式表达;表达量约占菌体蛋白总量的20%～30%.表达的目的蛋白与抗His标签抗体具有良好的反应性.结论:大鼠β细胞素基因在PET表达系统中得到高效表达;蛋白复性后能有效地促进NIH3T3细胞的体外增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	窦科峰	第四军医大学西京医院肝胆外科	539	2856	20.0	29.0
2	李开宗	第四军医大学西京医院肝胆外科	211	1179	13.0	23.0
3	韩骅	第四军医大学基础部遗传与发育生物学教研室	118	472	11.0	13.0
4	安家泽	第四军医大学西京医院肝胆外科	33	128	6.0	10.0
5	宋振顺	第四军医大学西京医院肝胆外科	42	195	8.0	12.0