变形链球菌葡聚糖结合蛋白D基因的分子克隆及其原核表达和初步纯化

• 作者: 刘艳丽 吴补领 孙叶芳 王秦芳 苏凌云 赵红萍 逄键梁
• 来源期刊: 临床口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 变形链球菌 葡聚糖结合蛋白D 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 604-607
• 页数: 4页
• 分类号: R378
• 字数: 3881字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-1634.2005.10.011

摘要

目的:克隆变形链球菌葡聚糖结合蛋白D(gbpD)基因,在大肠杆菌中表达并对重组蛋白进行初步纯化,为进一步的蛋白功能研究奠定基础.方法:体外培养变形链球菌UAl59菌株并以其基因组为模板,对gbpD基因编码区进行PCR扩增,连接pMD-18T载体并测序.随后将该片段克隆入原核表达载体PPRoEX HTb中,构建表达质粒pPROEX/gbpD,转化大肠杆菌DH5α并用IPTG诱导表达.表达产物经镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)柱进行亲和层析纯化.结果:成功克隆变形链球菌gbpD基因并在大肠杆菌中得到可溶性表达,经Ni-NTA柱纯化后获得纯度大于95%、相对分子量(Mr)为76×103的变链菌GbpD蛋白.结论:获得Mr为76×103的变形链球菌GbpD蛋白.对进一步确定GbpD的葡聚糖结合能力,探讨其在变链菌致龋过程中的作用,以及在龋病预防领域的应用前景都具有重要的意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙叶芳	第四军医大学口腔医学院	16	58	4.0	7.0
2	吴补领	第四军医大学口腔医学院	165	756	13.0	17.0
3	苏凌云	第四军医大学口腔医学院	36	151	7.0	10.0
4	赵红萍	第四军医大学口腔医学院	9	64	6.0	7.0
5	刘艳丽	第四军医大学口腔医学院	31	168	7.0	11.0
6	逄键梁	第四军医大学口腔医学院	13	47	4.0	6.0
7	王秦芳	第四军医大学口腔医学院	7	54	2.0	7.0