重组小鼠质粒pEGFP - NGB的构建和在培养神经胶质细胞中表达的实验研究

• 作者: 尹时华 李穗 鄢开胜 陈广理 陈沛 龚树生
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脑红蛋白 转染 神经胶质细胞
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1388-1392
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 4002字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2005.07.030

摘要

目的:构建重组小鼠质粒pEGFP-NGB并研究其在培养神经胶质细胞中的表达.方法:采用RT-PCR从小鼠脑组织总MA中扩增出该基因的全序列cDNA,并克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体中,构建重组质粒pEGFP-NGB表达载体.采用GeneJamer转染试剂和pEGFP-NGB重组子混合后转染至培养神经胶质细胞中,观察NGB在培养神经胶质细胞中mRNA以及蛋白表达.结果:阳性克隆测序结果显示所测序列与Genbank序列一致.RT-PCR和Western-blot结果表明转染重组质粒pEGFP-NGB培养神经胶质细胞NGB mRNA和蛋白均有较高的表达.荧光显微镜下观察发现,培养神经胶质细胞中有较多绿色荧光蛋白表达.结论:(1)成功构建pEGFP-NGB重组子;(2)构建的pEGFP-NGB重组子可在培养神经胶质细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚树生	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	90	506	11.0	18.0
2	陈沛	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	24	104	6.0	8.0
3	陈广理	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	17	68	6.0	7.0
4	鄢开胜	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	15	83	6.0	8.0
5	尹时华	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	5	28	4.0	5.0
6	李穗	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	6	38	5.0	6.0