绿色荧光蛋白-小鼠纤维介素蛋白融合基因表达载体的构建和表达

• 作者: 宁琴 汪之沫
• 来源期刊: 医学研究生学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 纤维介素蛋白 绿色荧光蛋白 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 289-291
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2420字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-8199.2005.04.001

摘要

目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)和小鼠纤维介素蛋白(mfgl 2)的融合蛋白表达载体,在仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达,为mfgl 2的RNA干扰体外研究提供简便的判断手段. 方法:用PCR从mfgl 2 cDNA文库中扩增出mfgl 2 cDNA片段,插入到GFP表达载体pEGFP-N2中GFP基因序列的上游,构建成GFP-mfgl 2融合基因表达载体pEGFP-mfgl 2, 将该载体转染到CHO细胞后24～48 h,通过荧光显微镜观察并摄片. 结果:扩增出长约1.3 kb的基因片段,经双酶切鉴定和测序鉴定无误;重组载体转染CHO细胞后,在荧光显微镜下可观察到GFP的表达.结论:成功构建了pEGFP-mfgl 2融合基因表达载体;重组载体可在CHO细胞中表达出GFP-mfgl 2融合蛋白,为下一步进行mfgl 2 RNA干扰研究提供了简便的判断手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宁琴	华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科	116	568	12.0	16.0
2	汪之沫	华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科	8	26	3.0	4.0