小鼠24p3基因真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

• 作者: 周建新 安江宏 陈彬
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 24p3/SIP24 稳定转染 小鼠NIH3T3细胞
• 年，卷（期）: 2005,（17）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1725-1728
• 页数: 4页
• 分类号: R394-33|R394.2
• 字数: 3842字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.17.003

摘要

目的构建小鼠24p3基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH3T3细胞中24p3/SIP24蛋白的表达情况,初步鉴定24p3/SIP24蛋白介导铁向细胞内转运的生物学功能.方法RT-PCR自小鼠肺组织中克隆24p3 cDNA.用基因重组技术构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体并行酶切和测序鉴定.脂质体DOTAP方法转染NIH3T3细胞,48 h后用G418筛选阳性克隆并培养扩增至21 d.对阳性克隆的培养基上清中24p3/SIP24蛋白的表达用ELISA和Westernblot分析,进一步用原子吸收分光光谱观察其介导铁向NIH3T3细胞内转运的生物学功能.结果成功克隆24p3cDNA并构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体,筛选出稳定表达24p3/SIP24蛋白的NIH3T3细胞株,24p3/SIP24蛋白在NIH3T3细胞上清中获得表达,并能介导铁向NIH3T3细胞内转运.结论24p3基因在NIH3T3细胞中获得表达,有良好的生物学活性,为进一步研究24p3/SIP24蛋白介导铁转运的生物学功能及作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈彬	第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室	45	276	9.0	14.0
2	安江宏	第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室	4	11	2.0	3.0
3	周建新	第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室	23	100	6.0	9.0