绿色巴夫藻cDNA文库的构建及EST序列分析

• 作者: 孔健 孔文涛 杨婧 牛艳
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 绿色巴夫藻 cDNA文库 SMART技术 序列表达标签 多不饱和脂肪酸
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 902-907
• 页数: 6页
• 分类号: Q949.26
• 字数: 4484字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1005-8737.2006.06.006

摘要

将绿色巴夫藻(Pavlova viridis)培养液逐种加入氨苄青霉素、硫酸庆大霉素、硫酸阿米卡星3种抗生素处理,经检验后无杂菌污染.以该藻种为实验材料,以λTriplEx2为载体,利用SMART技术构建其cDNA文库.经测定文库滴度为6×106pfu/mL,重组率为98%.利用PCR方法检测cDNA文库插入DNA片段的大小,其长度为0.5～2kb,表明该文库达到建库要求,可用来筛选低丰度mRNA的基因克隆.对cDNA文库中的阳性克隆进行随机PCR扩增,挑选插入DNA片段较大的克隆,进行5'末端单向序列测定,测序结果与NCBI数据库进行BLAST比对,获得了200个有研究价值的EST序列和cDNA克隆,为进一步研究和开发绿色巴夫藻的功能基因奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔健	山东大学微生物技术国家重点实验室	44	852	15.0	28.0
2	孔文涛	山东大学微生物技术国家重点实验室	8	78	5.0	8.0
3	杨婧	山东大学微生物技术国家重点实验室	4	3	1.0	1.0
4	牛艳	山东大学微生物技术国家重点实验室	2	3	1.0	1.0