iASPP特异性RNAi表达载体的构建及其干扰效果鉴定

• 作者: 刘泽军 王刚 辛海明 陈杰
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: ASPP 质粒 RNAi
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 900-902
• 页数: 3页
• 分类号: R394-33|R394.3|R73-36
• 字数: 2865字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.09.010

摘要

目的构建iASPP基因的RNAi真核表达载体PGCsilencerTM H1/Neo/GFP/RNAi,并观察其转染白血病细胞株Jurkat前后iASPP的表达变化以及其对细胞凋亡的影响.方法根据GenBank中iASPP的序列,设计特异性siRNA序列,将模板序列克隆至PGCsilencerTM H1/Neo/GFP质粒中,测序鉴定后,用脂质体将重组子转染至Jurkat细胞中,用RT-PCR方法检测iASPP的表达,用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化.结果经测序,模板序列与设计序列完全正确,RT-PCR检测Jurkat细胞中iASPP表达在转染干扰质粒后有明显的下降,转染后Jurkat细胞凋亡由11.81%增加到33.15%.结论成功构建了iASPP基因的RNAi真核表达载体,且其对白血病细胞有一定的干扰效果,为下一步探讨iASPP对肿瘤细胞中p53的抑癌作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈杰	第三军医大学西南医院国际合作实验室	74	450	12.0	18.0
2	刘泽军	第三军医大学西南医院国际合作实验室	58	178	8.0	10.0
3	王刚	第三军医大学西南医院国际合作实验室	20	146	7.0	11.0
4	辛海明	第三军医大学西南医院国际合作实验室	10	55	5.0	7.0