以Trx为骨架构建可诱导表达的酵母构象型随机肽库

• 作者: 孙万军 徐东刚 杜建芳 王嘉玺 王金凤 王颖 蔡欣 邹民吉
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 硫氧还蛋白 pBridge 可诱导 酵母构象型随机10肽库
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 201-205
• 页数: 5页
• 分类号: Q516
• 字数: 4222字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.03.001

摘要

目的:以硫氧还蛋白(Trx)为骨架,pBridge为载体,构建可诱导表达的酵母构象型随机10肽库.方法:利用PCR扩增出trx基因,向trx的突环区引入AscⅠ酶切位点,构建pBridge-mTrx重组载体.采用(NNK)10的编码方式设计并合成两条寡核苷酸链,经退火、延伸,AscⅠ,RsrⅡ双酶切后,克隆至pBridge-mTrx载体,电转化E.coli DH10B感受态细胞.对所构建多肽文库的库容和随机性进行了鉴定,并利用Western印迹对文库的可诱导性进行分析.结果:获得库容量为8.7×108的随机肽库.随机挑选20个克隆进行测序,4个核苷酸的出现频率与理论值接近.在Met缺陷培养基中,随机肽库可被诱导表达.结论:成功构建可诱导表达的随机肽库,为进一步筛选特异性多肽奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙万军		13	69	5.0	8.0
2	蔡欣	军事医学科学院基础医学研究所	22	80	6.0	7.0
3	王嘉玺	军事医学科学院基础医学研究所	57	335	9.0	16.0
4	邹民吉	军事医学科学院基础医学研究所	39	238	6.0	14.0
5	徐东刚	军事医学科学院基础医学研究所	75	421	10.0	17.0
6	杜建芳	军事医学科学院基础医学研究所	6	18	2.0	4.0
7	王金凤	军事医学科学院基础医学研究所	12	23	3.0	3.0
8	王颖	军事医学科学院基础医学研究所	16	60	4.0	6.0