一株新蛋白磷酸酶基因(Sy2)的原核表达载体构建及鉴定

• 作者: 倪芳 李菲菲 汪思应 郑红 陈兵 马广文 鲁云霞
• 来源期刊: 疾病控制杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白磷酸酶 遗传载体 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 339-342
• 页数: 4页
• 分类号: R342
• 字数: 2650字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-3679.2006.04.006

摘要

目的 用含有人Sy2酪氨酸磷酸酶基因的pOTB7质粒,构建Sy2原核表达重组子,并用该重组子转化原核细胞,表达出含Sy2的融合蛋白,为将来以此融合蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体,进一步研究该基因的功能打好基础.方法 用PCR扩增Sy2的PP2C结构域序列,限制性内切酶双酶切,构建到表达载体pET28a(+)中,酶切、测序等鉴定后,重组子pET28a(+)-Sy2转染原核细胞,用载体标签His抗体经SDS-PAGE、Western blot方法检测Sy2重组蛋白的表达.结果 成功构建出pET28a(+)-Sy2重组质粒,Western blot方法检测出融合蛋白的表达.结论 成功构建原核表达载体并在原核细胞中表达成包涵体,这种包涵体可以作为抗原制备Sy2的单克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马广文	淮北市人民医院骨科	7	43	3.0	6.0
2	陈兵	安徽医科大学基础医学院生化教研室	28	94	5.0	7.0
3	鲁云霞	安徽医科大学基础医学院生化教研室	48	229	8.0	12.0
4	郑红	安徽医科大学基础医学院病理生理教研室	36	156	8.0	10.0
5	倪芳	安徽医科大学基础医学院病理生理教研室	16	66	5.0	7.0
6	李菲菲	安徽医科大学基础医学院病理生理教研室	23	88	6.0	8.0