核盘菌EPSP合酶基因在大肠杆菌中的表达

• 作者: 于寒颖 杨谦
• 来源期刊: 北京林业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因表达 核盘菌 arom基因 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 页码范围: 103-108
• 页数: 6页
• 分类号: Q781
• 字数: 5332字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1522.2006.06.018

摘要

不含有内含子的核盘菌arom基因已经被扩增、测序.该基因编码五功能的AROM蛋白.为了大量获得核盘菌AROM蛋白的结构域之一5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS),将该菌arom基因编码脱氢奎尼酸合酶(DHQS)和EPSPS两结构域的DNA序列和只编码EPSPS结构域的DNA序列分别克隆入载体pGEX-4t-2和载体pET28b中,构建了4个表达载体pGEX-DE、pGEX-E、pET-DE和pET-E,并将其转入大肠杆菌DH5α、大肠杆菌BL21(DE3)或大肠杆菌JM109中表达.酶活测定和SDS-PAGE分析结果显示,上述编码序列在大肠杆菌细胞内获得了表达,含有表达载体pGEX-E、pET-DE和pET-E的大肠杆菌BL21(DE3)转化子具有EPSPS的催化活性,说明核盘菌arom基因的这些DNA片段可以被单独表达.核盘菌EPSPS异源表达系统的建立为该酶的抑制剂设计奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨谦	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	191	3458	29.0	49.0
2	于寒颖	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	8	26	3.0	4.0