蚓激酶基因在大肠杆菌中的表达

• 作者: 姜琼 易增兴 陈武
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 蚓激酶 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2008,（31）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 13557-13558
• 页数: 2页
• 分类号: S188
• 字数: 1646字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.31.032

摘要

[目的]实现蚓激酶基因在大肠杆菌中的高效表达.[方法]采用RT-PCR技术,以含蚓激酶基因的质粒pMD18-Tf3为模板进行RT-PCR扩增,克隆了蚓激酶基因Tfc,并进行测序,之后将蚓激酶基因Tfc克隆到大肠杆菌表达载体pBV220,转化大肠杆菌DH5α,用LB培养基于30 ℃培养24 h后,然后调温至42 ℃继续培养2 h诱导蚓激酶基因表达,收集菌体,进行SDS-PAGE电泳,利用纤维平板法检验蚓激酶的活性.[结果]测序发现该基因全长729 bp,共编码243个氨基酸,GenBank登录号为EU167735.SDS-PAGE电泳表明诱导表达后菌体总蛋白在28 kD处有一特异性条带,而含空质粒pBV220的大肠杆菌经诱导表达后无该条带,表达蛋白主要以包涵体形式存在,无纤维蛋白酶活性.[结论]该研究为创新蚓激酶的生产工艺提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈武	宜春学院生物工程研究所江西省天然药物活性成分研究重点实验室	59	659	13.0	23.0
2	姜琼	宜春学院生物工程研究所江西省天然药物活性成分研究重点实验室	18	59	4.0	6.0
3	易增兴	宜春学院生物工程研究所江西省天然药物活性成分研究重点实验室	18	83	4.0	8.0