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摘要:
[目的]实现蚓激酶基因在大肠杆菌中的高效表达.[方法]采用RT-PCR技术,以含蚓激酶基因的质粒pMD18-Tf3为模板进行RT-PCR扩增,克隆了蚓激酶基因Tfc,并进行测序,之后将蚓激酶基因Tfc克隆到大肠杆菌表达载体pBV220,转化大肠杆菌DH5α,用LB培养基于30 ℃培养24 h后,然后调温至42 ℃继续培养2 h诱导蚓激酶基因表达,收集菌体,进行SDS-PAGE电泳,利用纤维平板法检验蚓激酶的活性.[结果]测序发现该基因全长729 bp,共编码243个氨基酸,GenBank登录号为EU167735.SDS-PAGE电泳表明诱导表达后菌体总蛋白在28 kD处有一特异性条带,而含空质粒pBV220的大肠杆菌经诱导表达后无该条带,表达蛋白主要以包涵体形式存在,无纤维蛋白酶活性.[结论]该研究为创新蚓激酶的生产工艺提供了依据.
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文献信息
篇名 蚓激酶基因在大肠杆菌中的表达
来源期刊 安徽农业科学 学科 农学
关键词 蚓激酶 大肠杆菌 表达
年,卷(期) 2008,(31) 所属期刊栏目 农业生物技术
研究方向 页码范围 13557-13558
页数 2页 分类号 S188
字数 1646字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.31.032
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 陈武 宜春学院生物工程研究所江西省天然药物活性成分研究重点实验室 59 659 13.0 23.0
2 姜琼 宜春学院生物工程研究所江西省天然药物活性成分研究重点实验室 18 59 4.0 6.0
3 易增兴 宜春学院生物工程研究所江西省天然药物活性成分研究重点实验室 18 83 4.0 8.0
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研究主题发展历程
节点文献
蚓激酶
大肠杆菌
表达
研究起点
研究来源
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
安徽农业科学
半月刊
0517-6611
34-1076/S
大16开
安徽省合肥市农科南路40号
26-20
1961
chi
出版文献量(篇)
78281
总下载数(次)
236
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