幽门螺杆菌尿素酶A基因的克隆、表达及其抗原性的鉴定

• 作者: 宁云山 李妍 李明 董文其 龙敏
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 尿素酶A 克隆 基因表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 355-358
• 页数: 4页
• 分类号: R446.62
• 字数: 3234字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2006.04.001

摘要

目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)标准株NCTC11639尿素酶A(UreaseA,UreA)编码基因的重组质粒,测定、分析其核酸序列,并在E.coli中表达,研究其抗原性.方法应用PCR技术从Hp DNA染色体中扩增UreA编码基因片段,将其克隆至pMD18-T载体上进行序列测定,并与GenBank上公布的其它Hp菌株基因序列进行比较,再将目的基因克隆至表达载体pGEX-4T-1上进行表达和纯化,用Western-blot检测产物的抗原性并用于对24株抗Hp全菌小鼠单克隆抗体的鉴定.结果扩增的UreA基因全长675 bp(登录号为DQ141577),与GenBank上公布的其它Hp菌株的UreA核酸序列的同源性为95%～98%,表达的UreA融合蛋白分子量为52 000,表达产物可被病人血清和全菌免疫的小鼠血清识别,29株抗Hp小鼠单克隆抗体中有4株是针对UreA抗原的.结论重组UreA具有较好的抗原性,为Hp检测试剂和疫苗的研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明	南方医科大学生物技术学院	212	862	14.0	18.0
2	李妍	南方医科大学生物技术学院	47	170	6.0	10.0
3	宁云山	南方医科大学生物技术学院	29	79	4.0	7.0
4	龙敏	南方医科大学生物技术学院	35	142	6.0	10.0
5	董文其	南方医科大学生物技术学院	43	142	6.0	9.0