幽门螺杆菌标准株NCTC11639 HSPA基因的克隆、表达及其抗原性的鉴定

• 作者: 宁云山 李妍 李明 董文其 龙敏
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 螺杆菌,幽门 基因表达 热休克蛋白质类 克隆 抗原性
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 981-984
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3164字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2006.09.001

摘要

目的:构建含人幽门螺杆菌 (Helicobacter pylori,Hp)热休克蛋白 A( heat shock protein A,HSPA)编码基因的重组质粒,测定、分析其核酸序列,并在 E.coli 中表达 ,研究其抗原性.方法 :应用 PCR技术从 Hp DNA染色体中扩增 HSPA编码基因片段,将其 T- A克隆和测序,并与 GenBank公布的其他 Hp菌株基因序列比较,再将目的基因克隆至表达载体 pGEX- 4T- 1上进行表达和纯化,用 Western blot 检测产物的抗原性并用 ELISA法对 29株小鼠抗 Hp全菌单克隆抗体进行鉴定.结果: HSPA基因全长 351 bp( GenBank登录号为 DQ141574) ,核酸同源性为 96%～ 98%,表达的 HSPA融合蛋白分子量约为 41 ku,表达产物可被 Hp感染患者血清识别, 29株抗小鼠 Hp全菌单克隆抗体中有 4株是针对 HSPA抗原的.结论:重组 HSPA具有较好的抗原性,为 Hp疫苗的研究奠定基础.