人类肿瘤相关蛋白hyrdC的原核表达、抗体制备及其在胃癌中的初步检测

• 作者: 唐晓军 毕建威 袁扬 黄盛东 龚德军
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: hyrdC 单克隆抗体 免疫组织化学 胃肿瘤
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 620-623
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2591字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2006.06.010

摘要

目的:制备原核表达的hyrdC纯化蛋白及相应单克隆抗体,并以该抗体初步检测胃癌中hyrdC蛋白的表达.方法:用RT-PCR方法获取人hyrdC基因序列,插入原核表达载体pET32a构建重组质粒,纯化得到TRX-hyrdC融合蛋白,将其作为抗原免疫BALB/c小鼠,按常规方法制备抗hyrdC单克隆抗体,以ELISA、Western印迹法筛选及鉴定;采用免疫组织化学法(SP法)比较胃癌组织及瘤旁正常组织中hyrdC抗体水平的差异.结果:测序结果显示克隆的hyrdC ORF与GenBank中登录的序列一致.所获TRX-hyrdC融合蛋白相对分子质量与理论计算值相符,获得2株分泌抗hyrdC单克隆抗体的细胞株;Western印迹法显示该抗体能特异性地结合人hyrdC蛋白;SP法测定显示,hyrdC蛋白在胃癌组织中表达明显高于正常胃组织(P＜0.001).结论:成功制备了抗hyrdC单克隆抗体;SP法测定胃癌组织与瘤旁正常组织中hyrdC抗体水平有显著差异.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕建威	第二军医大学长海医院普通外科	98	653	12.0	21.0
2	龚德军	长海医院胸心外科	9	37	4.0	6.0
3	黄盛东	长海医院胸心外科	12	50	5.0	6.0
4	袁扬	长海医院胸心外科	3	16	2.0	3.0
5	唐晓军	第二军医大学长海医院普通外科	2	35	2.0	2.0