葡萄球菌肠毒素A基因的克隆、原核表达和鉴定

• 作者: 徐水凌 毛亚飞 项洪琴 颜丹红
• 来源期刊: 浙江预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 葡萄球菌肠毒素A 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-5,8
• 页数: 3页
• 分类号: R378.1+1
• 字数: 1786字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-0931.2006.07.002

摘要

目的克隆葡萄球菌肠毒索A(SEA)基因,构建其原核表达系统,鉴定重组蛋白(rSEA)免疫原性.方法采用PCR技术,从产SEA的葡萄球菌标准菌株ATCC13565基因组DNA中扩增全长SEA基因片段,T-A克隆后测序,构建pET32a-SEA表达质粒,转化入E.coli BL21DE3宿主菌,通过IPTG诱导表达,分离、纯化及Western印迹法鉴定.结果PCR获得SEA基因片段,DNA测序结果与已报道的SEA基因序列(GenBank No:L22566,AP004828)一致,构建了pET32a-SEA表达质粒,并成功地诱导、纯化了rSEA蛋白,rSEA表达量约为细菌总蛋白的40%.结论成功克隆了SEA全长基因,构建了rSEA原核表达系统,为进一步研制SEA的单克隆抗体及诊断试剂盒奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛亚飞	浙江大学医学院	41	232	9.0	12.0
2	徐水凌	嘉兴学院医学院	54	224	8.0	12.0
3	项洪琴	嘉兴学院医学院	2	11	2.0	2.0
4	颜丹红	嘉兴学院医学院	3	13	2.0	3.0