人Ⅱ型成对免疫球蛋白样受体β基因(PILRβ)的克隆、表达、纯化及其多克隆抗体的制备

• 作者: 厉建中 郭葆玉 陈霞
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Ⅱ型成对免疫球蛋白样受体β 克隆,分子 基因表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 1011-1013
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2765字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2006.09.021

摘要

目的:表达和纯化人Ⅱ型成对免疫球蛋白样受体蛋白PILRβ,制备并鉴定其多克隆抗体.方法:应用RT-PCR从人的外周血细胞总RNA中反转录并扩增出PILRβ基因,将其克隆到表达载体pET-32a,在大肠杆菌中IPTG诱导表达,经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,纯化后的蛋白多次注射免疫新西兰大白兔,获取多克隆抗血清,ELISA法检测抗体效价,Western印迹检测抗体特异性.结果:获得了较高纯度的PILRβ蛋白(Mr约为42 000)及其抗体,多抗效价达到1:10 000,且特异性较好.结论:成功克隆了PILRβ基因并表达纯化了其蛋白,获得了效价较高、特异性较强的多克隆抗体,为进一步研究PILRβ蛋白的功能和潜在的药物开发打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭葆玉	第二军医大学药学院生化药学教研室	43	201	8.0	11.0
2	陈霞	中国科学院上海生物工程生物研究中心	23	146	7.0	11.0
3	厉建中	第二军医大学药学院生化药学教研室	23	61	5.0	6.0