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摘要:
目的克隆并表达具有生物学活性的人层黏连蛋白α4链LG1组件(human laminin alpha4 chain LG1 module,hLNα4LG1)蛋白.方法RT-PCR扩增hLNα4LG1的cDNA片段并将其插入pMD-18T载体进行测序.将测序片段亚克隆入原核表达载体pET-28a并在BL21(DE3)大肠杆菌中进行表达,Western blot对表达蛋白进行鉴定.用Ni-NTA亲和柱对目的蛋白进行纯化,并通过细胞黏附与伸展实验对其生物学活性进行检测.结果成功克隆了hLNα4LG1的cDNA片段,SDS-PAGE及Western blot分析显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET28a-LG1总蛋白中出现一条分子量为26×103的新蛋白带.与对照组相比,Ni-NTA亲和层析纯化的目的蛋白有明显促进A549细胞伸展与黏附的作用.结论克隆并原核表达了hLNα4LG1蛋白,目的蛋白具有促进细胞黏附与伸展的活性,为深入研究hLNα4LG1的功能奠定了基础.
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文献信息
篇名 hLNα4LG1基因克隆、表达及生物学活性检测
来源期刊 第三军医大学学报 学科 生物学
关键词 hLNα4LG1 基因克隆 原核表达
年,卷(期) 2006,(14) 所属期刊栏目 基础医学
研究方向 页码范围 1464-1466
页数 3页 分类号 Q279|Q51|Q78
字数 3112字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.14.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李晓辉 第三军医大学基础医学部药理学教研室 168 1187 19.0 30.0
2 戴旭芳 重庆师范大学特殊教育学院 25 110 5.0 10.0
3 何凤田 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 127 592 12.0 15.0
4 连继勤 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 32 122 7.0 9.0
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研究主题发展历程
节点文献
hLNα4LG1
基因克隆
原核表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
第三军医大学学报
半月刊
1000-5404
50-1126/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩30号
78-91
1979
chi
出版文献量(篇)
15739
总下载数(次)
28
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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