hLNα4LG1基因克隆、表达及生物学活性检测

• 作者: 何凤田 戴旭芳 李晓辉 连继勤
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: hLNα4LG1 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（14）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1464-1466
• 页数: 3页
• 分类号: Q279|Q51|Q78
• 字数: 3112字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.14.004

摘要

目的克隆并表达具有生物学活性的人层黏连蛋白α4链LG1组件(human laminin alpha4 chain LG1 module,hLNα4LG1)蛋白.方法RT-PCR扩增hLNα4LG1的cDNA片段并将其插入pMD-18T载体进行测序.将测序片段亚克隆入原核表达载体pET-28a并在BL21(DE3)大肠杆菌中进行表达,Western blot对表达蛋白进行鉴定.用Ni-NTA亲和柱对目的蛋白进行纯化,并通过细胞黏附与伸展实验对其生物学活性进行检测.结果成功克隆了hLNα4LG1的cDNA片段,SDS-PAGE及Western blot分析显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET28a-LG1总蛋白中出现一条分子量为26×103的新蛋白带.与对照组相比,Ni-NTA亲和层析纯化的目的蛋白有明显促进A549细胞伸展与黏附的作用.结论克隆并原核表达了hLNα4LG1蛋白,目的蛋白具有促进细胞黏附与伸展的活性,为深入研究hLNα4LG1的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓辉	第三军医大学基础医学部药理学教研室	168	1187	19.0	30.0
2	戴旭芳	重庆师范大学特殊教育学院	25	110	5.0	10.0
3	何凤田	第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室	127	592	12.0	15.0
4	连继勤	第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室	32	122	7.0	9.0