汉滩病毒84FLi株L片段全长cDNA克隆的构建及鉴定

• 作者: 姜泓 张野 李新红 王平忠 白雪帆 黄长形
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 汉坦病毒 依赖RNA的RNA聚合酶 基因克隆
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 905-908
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R939.4
• 字数: 3021字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.06.005

摘要

目的:克隆汉滩病毒84FLi株L片段的cDNA.方法:提取病毒总RNA,反转录为cDNA模板,用高保真的Taq酶扩增出含有L片段部分克隆的片段84L1(1-1875)、84L2(1725-3352)、84L3(2921-4961)和84L4(4727-6533),将这4个片段分别与T载体pGEM-T-Easy连接,转化感受态大肠杆菌后获得4个克隆pGEM-L1、pGEM-L2、pGEM-L3和pGEM-L4.利用酶切连接方法获得pGEM-L12和pGEM-L34,2段产物覆盖全长的L片段,并且于2921-3352 nt区域内相互重叠;再利用酶切连接的方法获得了含有L片段全序列的cDNA克隆.结果:获得6个含有L片段部分片段的克隆,进而酶切组装为含有L片段全序列的cDNA克隆.结论:应用分段克隆和逐次拼接法成功构建了84FLi株L片段全序列的cDNA克隆.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李新红	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	17	87	4.0	9.0
2	黄长形	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	101	516	12.0	17.0
3	白雪帆	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	191	850	14.0	19.0
4	王平忠	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	72	342	10.0	14.0
5	张野	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	48	152	7.0	10.0
6	姜泓	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	30	104	5.0	9.0