茶尺蠖小RNA病毒全长cDNA克隆的构建

• 作者: 叶姗 张珈敏 林美娟 胡远扬 谢键
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 茶尺蠖小RNA病毒 全长cDNA克隆 传染性软化病毒科 反向遗传学
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 818-823
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

为了初步研究茶尺蠖小RNA病毒(Ectropis oblique picorna-like virus,EoPV)的复制机制,从被EoPV感染致死的茶尺蠖幼虫中分离并纯化病毒粒子,提取病毒RNA,根据已公布的EoPV核苷酸序列,利用基因组上单一的酶切位点,设计特异性引物,应用RT-PCR扩增出5个覆盖全长的片段.随后采用融合PCR将5个片段拼接,最终将全长定向克隆到低拷贝质粒载体上,成功构建cDNA全长克隆p-EoPV.双酶切及测序鉴定证明全长克隆构建成功.与原序列比较发现,该克隆在氨基酸水平上有8个突变和1个缺失.本研究为深入探讨EoPV病毒生物学特性、病毒复制机理等奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张珈敏	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	34	221	10.0	13.0
2	胡远扬	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	35	228	9.0	14.0
3	林美娟	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
4	谢键	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
5	叶姗	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	1	2	1.0	1.0