猪细小病毒NS1基因的原核表达及重组蛋白的复性

• 作者: 刘占通 崔保安 王学斌 田永军 金喜新 魏战勇
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 NS1基因 原核表达 变性 复性
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 侵染和免疫
• 页码范围: 126-130
• 页数: 5页
• 分类号: S8
• 字数: 5354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2007.01.026

摘要

利用PCR技术扩增出PPVNS1基因抗原区.将目的基因与原核表达载体pGEX-4T-1进行连接并转化,重组质粒经鉴定并测序.测序结果表明,目的基因插入的位置、大小和读码框均正确,通过试验摸索并确定了表达NS1基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为1.0mmol/L,诱导时间为10h,温度为37℃,其表达量占全菌蛋白的29.8%.表达产物经SDS-PAGE分析,得到分子量约为52kDa的重组蛋白且以包涵体形式存在.重组蛋白经Western blot检测,结果证明重组蛋白可被PPV阳性血清识别.用8mol/L尿素变性溶解包涵体,再用稀释方法和还原型、氧化型谷胱甘肽系统相结合的方法对重组蛋白进行复性.ELISA检测表明,复性后的重组蛋白有良好的生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔保安	河南农业大学河南省动物食品安全重点实验室	274	2313	25.0	33.0
2	王学斌	河南农业大学河南省动物食品安全重点实验室	36	465	12.0	20.0
3	魏战勇	河南农业大学河南省动物食品安全重点实验室	71	500	12.0	18.0
4	金喜新	河南农业大学河南省动物食品安全重点实验室	8	21	3.0	4.0
6	刘占通	河南农业大学河南省动物食品安全重点实验室	11	160	6.0	11.0
12	田永军	河南农业大学河南省动物食品安全重点实验室	1	10	1.0	1.0