含人CCR5Delta32基因重组慢病毒的包装及滴度测定

• 作者: 夏爱军 安群星 张献清 穆士杰 陈蕤
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: CCR5Delta32基因 慢病毒载体 包装 滴度测定 人免疫缺陷病毒 获得性免疫缺陷综合征
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 891-893
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 3083字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.06.001

摘要

目的:包装含人CCR5Delta32基因的重组慢病毒并测定其滴度,用于获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的基因治疗研究.方法:从CCR5Delta32突变个体外周血单个核细胞(PBMC)中提取人基因组DNA,利用PCR技术扩增CCR5Delta32全长基因,经EcoRⅠ单酶切后与pUCm-T载体连接,随后转化E.coli DH5α,提取质粒进行酶切鉴定及DNA测序;将鉴定正确的CCR5Delta32基因亚克隆至慢病毒载体pknti6/V5-D-TOPO并进行酶切鉴定及DNA序列分析;用pLP1、pLP2、pLP/VSVG及pknti-CCR5Delta32等4种质粒共转染293T细胞,产生重组慢病毒并测定其滴度.结果:克隆出人CCR5Delta32基因,并构建了含该基因的重组慢病毒载体,经293T细胞包装后产生5×105 TU/mL的重组慢病毒.结论:高滴度含人CCR5Delta32基因重组慢病毒的包装,为进一步的AIDS基因治疗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	穆士杰	第四军医大学西京医院输血科	201	760	13.0	18.0
2	张献清	第四军医大学西京医院输血科	176	539	9.0	15.0
3	夏爱军	第四军医大学西京医院输血科	90	248	8.0	12.0
4	安群星	第四军医大学西京医院输血科	61	151	7.0	9.0
5	陈蕤	第四军医大学西京医院输血科	30	38	4.0	4.0