GEFS+致病相关基因SCN1A表达载体的定点诱变

• 作者: 孙卫文 廖卫平 石奕武 蔡阳林 赵绮华 邓维意 高枚眉 龙跃生
• 来源期刊: 广州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 聚合酶链反应 诱变,定点 SCN1A 癫痫
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 62-64
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 1758字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-1836.2007.02.018

摘要

目的:利用长距离PCR定点突变技术对GEFS+致病相关基因SCN1A进行定点诱变.方法:在突变位点处设计一对延伸方向相反的引物,通过长距离 PCR扩增,得到携带突变位点的新质粒;然后用Dpn I酶切去掉母质粒;再转化至大肠杆菌进行克隆.结果:DNA测序表明:在预期位点已经发生突变,SCN1A所编码的第1765位密码子由苯丙氨酸(Phe)突变为亮氨酸(Leu).结论:SCN1A突变表达载体的构建成功,为进一步研究该突变位点导致I型电压依赖型钠通道功能的改变奠定了基础.