三黄鸡CD8α/βcDNA克隆与表达及其多克隆抗体的制备

• 作者: 唐秀山 夏春 廖定为 王磊 蒋一男
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 CD8α CD8β 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: Q785|S831
• 字数: 3222字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-4333.2007.05.002

摘要

为了获得鸡CD8α/β蛋白及其多克隆抗体,进一步研究其结构与功能,本实验从三黄鸡cDNA文库中克隆了其CD8α/β胞外区片段,构建了pQE30/ChCD8α/β原核表达系统,并经诱导表达、亲和层析纯化,获得了纯化的重组蛋白(rChCD8α/β),然后用rChCD8α/β分别免疫Balb/c小鼠制备了其多克隆抗体.结果表明:本实验克隆的ChCD8α长483 bp、编码161个氨基酸、可在E.coli JM109 中高效表达,蛋白质分子质量为24.0 ku,表达量占菌体蛋白量的25.0%,由该蛋白质所制备的多克隆抗体抗rChCD8α的ELISA效价为1∶1 024 000;另外,克隆的ChCD8β长447 bp, 编码149个氨基酸,蛋白质的分子质量为18.5 ku,表达量占菌体蛋白量的20.0%,抗rChCD8β多克隆抗体ELISA效价为1∶64 000.本实验所得鸡CD8α/β的多克隆抗体将用于四聚体研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏春	中国农业大学动物医学院	68	1187	22.0	31.0
2	王磊	中国农业大学动物医学院	169	1864	23.0	36.0
3	唐秀山	中国农业大学动物医学院	3	13	2.0	3.0
4	廖定为	中国农业大学动物医学院	3	13	2.0	3.0
5	蒋一男	中国农业大学动物医学院	5	40	5.0	5.0