边缘无浆体MSP5蛋白基因的克隆及原核表达

• 作者: 任巧云 关贵全 刘军龙 刘志杰 刘爱红 李有全 殷宏 王凡 罗建勋 赵海平 马米玲 高金亮
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 边缘无浆体 MSP5蛋白基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 578-582
• 页数: 5页
• 分类号: S852.72|Q78
• 字数: 3917字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.07.007

摘要

参照已发表的边缘无浆体主要表面蛋白5(MSP5)基因的核苷酸序列,设计了1对特异性引物,以边缘无浆体基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增获得了MSP5蛋白基因.将其克隆到pGEM-T Easy载体,并进行测序分析.结果表明,克隆的MSP5基因与GenBank上登录的Florida株MSP5蛋白基因的序列同源性达98.6%,编码氨基酸的同源性为99.0%,并且该序列包含有完整的开放阅读框,大小为633 bp.将该基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组原核表达载体.将其转化到DH5a宿主菌中,用IPTG进行诱导表达,实现了融合表达,表达产物的分子质量为45 ku.Western-blot分析表明,此表达产物能够被抗边缘无浆体阳性血清所识别.