利用基因捕获技术建立稳定表达HBV的细胞模型

• 作者: 何云燕 李毅 汤华 谭畅 黄爱龙
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: PU21基因捕获载体 乙型肝炎病毒(HBV) 表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 24-28
• 页数: 5页
• 分类号: Q2
• 字数: 3181字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2007.02.005

摘要

pGEM-HBVl.3质粒经HindⅢ限制性内切酶消化,将HBV1.3全长DNA切下,与同样经HindⅢ限制性内切酶降解过的PU21连接,得到PU21-HBV重组质粒.将该重组质粒采用电击转染方法导入HepG2细胞中,G418筛选阳性克隆并以X-gal染色,RT-PCR、Southern blot等方法验证HBV DNA的插入和表达.PU21-HBV重组质粒经测序证明HBV1.3全长DNA正确与PU21载体连接,该重组质粒转染HepG2细胞后经G418筛选,得到一系列阳性克隆,Southern blot证实HepG2细胞基因组中含HBV DNA,RT-PCR结果表明HBV DNA在HepG2细胞中有功能基因的转录.HBV1.3已被整合在HepG2细胞染色体中并能稳定表达其RNA.稳定的HBV表达细胞模型构建成功.HBV表达细胞模型的建立,为进一步研究相关基因对HBV的转录、复制、转录后调节以及HBV各种蛋白的表达机理研究提供实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄爱龙	重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室	236	1190	16.0	23.0
2	李毅	重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室	22	134	5.0	11.0
3	汤华	重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室	16	40	3.0	5.0
4	何云燕	重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室	2	5	2.0	2.0
5	谭畅	重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室	1	3	1.0	1.0