口蹄疫病毒3B基因的高效表达及其表达产物的反应活性

• 作者: 刘盛梅 徐维加 曹永长 毕英佐 覃健萍 谢青梅 陈峰 马静云
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 3B基因 高效可溶性表达 鉴别诊断ELISA
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 867-872
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6|Q786
• 字数: 5328字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.10.011

摘要

通过PCR技术获得口蹄疫病毒非结构蛋白3B基因,将其克隆至质粒pET-32a(+)和高效可溶性表达质粒pEM中,经PCR筛选,获得阳性重组子pET-3B和pEM-3B,将它们转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,SDS-PAGE及Western-blot检测结果证明,表达的3B融合蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应.蛋白可溶性分析表明,EM-3B融合蛋白绝大部分以可溶形式表达.以此可溶性融合蛋白EM-3B为抗原建立了可区分FMD免疫动物和感染动物的EM-3B-DIVA-ELISA方法,经检测,其特异性为95.0%,敏感性为97.5%,与2个国产试剂盒的符合率分别为96.25%和98.75%.