猪肌肉生长抑制素基因的克隆及原核表达

• 作者: 张克英 陈代文 鲍淑青 龙定彪
• 来源期刊: 动物营养学报
• 学科: 农学
• 关键词: 肌肉生长抑制素 克隆 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 617-621
• 页数: 5页
• 分类号: S8
• 字数: 3907字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-267X.2007.05.016

摘要

本试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白.根据基因库肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ酶切位点及保护碱基,提取汉普夏猪的骨骼肌总RNA,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切,克隆到pET-30a(+)中,构建原核表达载体pET-30a-M,将重组表达质粒转化至E.coli BL21(DE3)中,诱导表达.结果表明,成功扩增出肌肉生长抑制素全长基因;克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与国外报道的完全一致;成功构建原核表达载体pET-30a-M;经IPTG诱导,表达出了6×His-M融合蛋白,用组氨酸标签抗体做Western印记证明产物大约48 ku,与预期大小相符,肌肉生长抑制素蛋白在大肠杆菌中成功的进行了表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈代文	四川农业大学动物营养研究所	369	4446	31.0	50.0
2	张克英	四川农业大学动物营养研究所	259	3496	27.0	45.0
3	龙定彪	四川农业大学动物营养研究所	6	55	5.0	6.0
4	鲍淑青	四川农业大学动物营养研究所	3	40	2.0	3.0