甾醇C-22去饱和酶高表达对酵母细胞麦角甾醇合成的影响

• 作者: 何秀萍 刘楠 张博润 蔡鹏丽
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 酿酒酵母 甾醇C-22去饱和酶基因(ERG5) 高表达 麦角甾醇
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 274-279
• 页数: 6页
• 分类号: Q93
• 字数: 4381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2007.02.018

摘要

通过PCR扩增克隆到酵母菌甾醇C-22去饱和酶基因 (ERG5) 的编码序列及其终止子序列,以大肠杆菌-酿酒酵母穿梭质粒YEp352为载体,以磷酸甘油酸激酶基因PGK1 启动子为上游调控元件构建了酵母菌表达质粒pYPE5.以铜离子螯合蛋白基因 CUP1替换ERG5基因内部序列获得ERG5 破坏菌株YSE5,其中麦角甾醇的合成被阻断,而积累了甾醇中间体Ergosta-5,7-dien-3β-ol.表达质粒pYPE5转化破坏菌株后使细胞恢复了合成麦角甾醇的能力.说明表达质粒上的 ERG5基因得到了功能性的表达.将表达质粒pYPE5转化酿酒酵母单倍体菌株YS58,通过营养缺陷互补筛选到重组菌株YS58(pYPE5).对重组菌株、破坏菌株和互补菌株细胞甾醇组分和含量进行测定,发现重组菌株和互补菌株的麦角甾醇和总甾醇含量明显低于对照菌YS58(YEp352).测定不同培养时间细胞的麦角甾醇含量,发现重组菌株的麦角甾醇含量始终低于对照菌YS58(YEp352).可见, ERG5 在酵母中的高表达导致细胞麦角甾醇含量降低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何秀萍	中国科学院微生物研究所	53	769	15.0	25.0
2	张博润	中国科学院微生物研究所	71	1224	18.0	31.0
3	刘楠	中国科学院微生物研究所	15	173	9.0	13.0
4	蔡鹏丽	中国科学院微生物研究所	1	17	1.0	1.0