幽门螺杆菌Omp22-HpaA融合基因工程菌蛋白的表达

• 作者: 任义 宋春花 段广才 范清堂 郗园林 黄学勇 黄志刚
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 基因工程菌 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 242-245
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2747字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2007.02.016

摘要

目的:优化幽门螺杆菌Omp22-HpaA基因工程菌pMAL-c2X-Omp22-HpaA-TB1的表达条件,并对其表达产物进行纯化和鉴定.方法:在不同诱导时机、不同诱导剂(IPTG)浓度和不同诱导时间条件下诱导pMAL-c2X-Omp22-HpaA-TB1的表达,测定目的蛋白的表达量.在优化条件下诱导工程菌表达,并应用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,采用Amyloss树脂预装柱对可溶性Omp22-HpaA蛋白进行分离、纯化,对纯化后的蛋白行Western blot分析.结果:工程菌培养2 h时加入IPTG(终浓度为0.4 mmol/L)诱导7 h,目的蛋白Omp22-HpaA表达量达到菌体总蛋白的20%以上.经纯化得到了较高纯度(＞90%)的目的蛋白,并具有良好的免疫原性.结论:建立了从pMAL-c2X-Omp22-HpaA-TB1可溶性表达产物中纯化较高纯度Omp22-HpaA融合蛋白的方法.