幽门螺杆菌hpaA基因工程菌蛋白表达条件优化、纯化及其活性鉴定

• 作者: 宋春花 段广才 范清堂 郗园林 黄学勇 黄志刚
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 基因工程 高效表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 248-251
• 页数: 4页
• 分类号: R183
• 字数: 3504字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2007.02.030

摘要

目的:优化幽门螺杆菌hpaA基因工程菌(pMAL-c2X-hpaA-TB1)的表达条件,并对其表达产物进行纯化和免疫活性鉴定.方法:通过诱导表达实验了解不同诱导时机、诱导剂浓度、诱导时间对蛋白表达量的影响, 并应用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析;Amyloss树脂预装柱对可溶性HpaA蛋白进行分离、纯化;对纯化后蛋白做Western blot实验鉴定免疫活性.结果:该工程菌培养2 h时加入异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度为0.3 mmol/L进行诱导4 h,目的蛋白表达量达到菌体总蛋白的30%以上;经纯化得到了较高纯度(＞90%)的目的蛋白,并具有良好的免疫活性.结论:建立了从TB1(pMAL-c2X-hpaA)可溶性表达产物中纯化高纯度rHpaA融合蛋白的方法,为进一步的动物实验和诊断性抗原的研制以及工程菌发酵、高效表达生产工艺的研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段广才	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	174	980	15.0	21.0
2	郗园林	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	119	673	13.0	20.0
3	范清堂		38	152	5.0	10.0
4	宋春花	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	48	276	9.0	14.0
5	黄学勇	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	5	35	3.0	5.0
6	黄志刚		3	8	2.0	2.0