TIMP-4真核表达载体的构建及其作用机制的研究

• 作者: 周梦云 沈飞 范磊 董宁征 阮长耿
• 来源期刊: 中国血液流变学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 组织基质金属蛋白酶抑制剂-4 真核表达 HMEC-1 血管形成
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 190-192,195
• 页数: 4页
• 分类号: R392.32
• 字数: 2609字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-881X.2007.02.006

摘要

目的 构建人组织基质金属蛋白酶抑制剂-4(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases type-4,TIMP-4)的真核表达载体,并探讨TIMP-4体外对血管新生的影响.方法 根据已公布的基因序列设计相应引物,用RT-PCR方法从人微血管内皮细胞株HMEC-1的cDNA中扩增TIMP-4片段,采用限制性内切酶HindⅢ和Xhol Ⅰ将目的片段插入PcDNA3.1/V5-His-TOPO真核表达载体中.经过酶切和PCR鉴定后通过脂质体介导转染至HMEC-1细胞中进行表达.以Realtime PCR和Western Blotting分别检测TIMP-4在HMEC-1中mRNA和蛋白水平的表达;利用Matrigle进行血管形成试验,观察TIMP-4对血管新生的影响.结论 构建PcDNA3.1/V5-His-TOPO-TIMP-4真核表达质粒,并获得高表达TIMP-4的HMEC-1细胞株,证实了TIMP-4体外抑制血管形成的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周梦云	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	7	11	3.0	3.0
2	范磊	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	8	45	3.0	6.0
3	董宁征	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	42	164	7.0	11.0
4	沈飞	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	22	56	3.0	6.0
5	阮长耿	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	188	746	13.0	17.0