猪捷申病毒3D蛋白的原核高效表达及其反应活性

• 作者: 冯力 吴波平 孙东波 时洪艳 白兴华 陈建飞 高秀春
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪捷中病毒 3D基因 RNA依赖的RNA聚合酶 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 131-134
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 3551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.02.011

摘要

根据猪捷申病毒(PTV)Swine/CH/IMH/03株核苷酸序列,设计了1对特异性引物,以全长基因组重组质粒pSK-PTVFL为模板扩增了3D基因,并将扩增产物定向克隆到原核表达载体pET30a(+)中,阳性质粒转化BL21(DE3),阳性菌经0.3 mmol/LIPTG诱导后,进行Western-blotting检测.结果显示,3D蛋白获得了高效表达,表达量占菌体总蛋白的66.1%,且重组蛋白能与PTV Swine/CH/IMH/03株阳性血清发生特异性反应.表明,3D蛋白能在大肠杆菌中高效表达,并具有良好的免疫原性,这为开发相应的鉴别诊断技术奠定了基础.