结核分枝杆菌Rv1009结构域基因的克隆、表达及亲和层析纯化

• 作者: 刘家云 师长宏 张建芳 徐志凯 柏银兰 樊爱琳 程晓东 苏明权 郝晓柯 马静
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 克隆 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 557-560
• 页数: 4页
• 分类号: R378.911|Q78
• 字数: 4620字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.04.002

摘要

目的:克隆结核分枝杆菌Rv1009结构域基因,经序列测定正确后进行融合表达和纯化.方法:采用PCR从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1009结构域基因,用限制性内切酶消化后插入pUC-19克隆载体中,经测序正确后亚克隆到融合表达载体pPro-EXHT中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了N端带6个连续组氨酸残基的Rv1009结构域多肽,在变性条件下对目的蛋白进行纯化.结果:获得了结核分枝杆菌Rv1009结构域基因,得到融合6个组氨酸残基的Rv1009结构域多肽,纯化获得的蛋白纯度大于87%.结论:构建了结核分枝杆菌Rv1009结构域基因的重组表达载体,并获得了高纯度的融合表达蛋白,为后续深入研究奠定了基础.