特异识别HIV-1序列的锌指蛋白的表达纯化及其在Biacore CM-5芯片上的固定

• 作者: 刘娟 朱旭东 蒋世卫 赵兴卉 黄培堂
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 锌指 HIV-1 包涵体 Biacore 3000 CM-5芯片
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 437-440
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 字数: 3858字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.03.022

摘要

目的:为了更好地利用Biacore 3000研究锌指与核酸的相互作用,将特异性识别HIV-1 5'端一段保守序列的三锌指蛋白固定在CM-5芯片上.方法:将特异性识别HIV-1 5'端一段保守序列5'-CTGTGTTTG-3'的三锌指基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达重组三锌指蛋白,超声碎菌进行SDS-PAGE分析;包涵体形式的表达产物用盐酸胍溶解后,经一步凝胶柱复性并纯化;随后摸索适宜固定的pH值并通过化学方法进行固定.结果:表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在于超声沉淀中,纯化及柱复性后的蛋白纯度为98.8%,并在CM-5芯片上成功固定.结论:本研究为利用Biacore实时定量研究锌指蛋白与其识别DNA的相互作用进行了尝试.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄培堂	军事医学科学院生物工程研究所	190	1493	20.0	30.0
2	蒋世卫	军事医学科学院生物工程研究所	5	12	2.0	3.0
3	朱旭东	军事医学科学院生物工程研究所	28	118	6.0	9.0
4	刘娟	军事医学科学院生物工程研究所	8	76	5.0	8.0
5	赵兴卉	军事医学科学院生物工程研究所	2	1	1.0	1.0